《营养学报》
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.2 仪器与设备
1.3 试验方法
1.3.1 甜菊醇糖苷提取及含量测定
1.3.2 基因表达量检测
1.3.3 实时荧光定量PCR引物设计及基因表达检测
1.3.4 数据统计与分析
2 结果与分析
2.1 9种甜菊醇糖苷在3个品种3个生长发育时期中的含量变化
2.2 3个品种3个生长发育时期甜菊醇糖苷合成关键酶基因表达变化
2.3 不同甜菊醇糖苷含量与其合成关键酶基因表达量的相关分析
3 讨论
3.1 甜菊醇糖苷在不同甜叶菊品种积累差异
3.2 生物合成途径相关基因表达量对甜菊醇糖苷积累的影响
4 结论
文章摘要:为了研究甜叶菊中主要甜菊醇糖苷积累特点与其生物合成关键基因表达量的关系,本研究选取3个品种甜叶菊(普赛科3号、中山2号、同心)为试验材料,定期在幼苗期、营养生长期、花蕾期采收植株的上位3对叶片,采用液相色谱-质谱法(LC-MS)检测9种甜菊醇糖苷,即莱宝迪苷A、B、C、D、E、F(RA、RB、RC、RD、RE、RF)、甜菊糖苷(ST)、甜茶糖苷(RBS)和杜尔可苷A(DA)含量,同时利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析糖苷生物合成的3个UDP-糖基转移酶(UGTs)关键基因,即SrUGT91D2e、SrUGT74G1和SrUGT76G1的表达水平。结果表明,甜味糖苷RA在普塞科3号营养生长期含量最高(1.60 mg·g-1), RD在普塞科3号的花蕾期含量最高(1.58 mg·g-1);苦味糖苷ST、RC、DA在普塞科3号中的积累量显著低于中山2号和同心(普塞科3号ST为0.50 mg·g-1、RC为0.26 mg·g-1、DA为0.01 mg·g-1),因此普塞科3号可作为甜味糖苷高产选育品种。对甜菊醇糖苷生物合成关键基因表达量与糖苷含量进行相关性分析,甜味糖苷RD和RA的含量与其关键影响因子SrUGT91D2e和SrUGT76G1的表达量显著相关,苦味糖苷RC、ST、DA的含量与其关键影响因子SrUGT74G1的表达量显著相关。本试验为甜叶菊不同甜度糖苷的品种选育及采收时间的确定提供了依据。
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